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Title: Estandarización de PCR convencional para la genotipificación de bacterias productoras de BLEE
Authors: Guamán Hurtado, Jakeline Elizabeth
Garcés Chiriboga Katherine Gabriela
Keywords: Ecuador.
Tesis digital.
Issue Date: 2024
Citation: Garcés Chiriboga Katherine Gabriela Guamán Hurtado, J. E. (2024) Estandarización de PCR convencional para la genotipificación de bacterias productoras de BLEE [Tesis de Posgrado, Universidad Técnica Particular de Loja]. Repositorio Institucional. https://dspace.utpl.edu.ec/handle/123456789/55319
Abstract: Abstract: Antimicrobial resistance is a growing concern worldwide, with evolutionary changes in bacteria, particularly Enterobacteriaceae. These changes cause the development of bacterial defense mechanisms against antibiotics. One such mechanism invloves the production of enzymes, such as beta-lactamases, which inhibit the effect of beta-lactam antibiotics used in the treatment of various infectious diseases. This limitation hinders the ability to provide timely and effective treatment to patients, which can lead to deaths. Several diagnostic methods have been developed for the identification of bacteria and the assessment of resistance, including phenotypic and molecular techniques such as PCR and genetic sequencing.These metodologies allow the detection and genotyping of bacteria producing extended-spectrum beta-lactamases ( ESBL). With the aim of improving clinical diagnosis, the ESBL genotyping technique has been standardized using conventional PCR, evaluating genes such as blaCTXM, blaTEM and blaSHV. The validation of this technique was carried out through Sanger sequencing, confirming successful gene amplification in randomly select samples.
Description: Resumen: La resistencia bacteriana es una preocupación creciente a nivel mundial, con cambios evolutivos en las bacterias, particularmente en los Enterobacteriales. Estos cambios provocan el desarrollo de mecanismos de defensa por parte de las bacterias frente a los antibióticos, uno de ellos es la producción de enzimas; como las betalactamasas, las cuales inhiben el efecto de los antibióticos betalactámicos que son utilizados en el tratamiento de diversas enfermedades infecciosas, lo que limita el tratamiento adecuado y oportuno de los pacientes, pudiendo provocar muertes. Se han desarrollado diversos métodos de diagnóstico tanto para la identificación de bacterias como para la determinación de resistencias, incluidos los fenotípicos y las técnicas moleculares como la PCR y la secuenciación genética, las cuales permiten detectar y genotipificar las bacterias productoras de betalactamasas de espectro extendido (BLEE). Con el objetivo de mejorar el diagnóstico clínico, se ha estandarizado la técnica de genotipificación de BLEE mediante PCR convencional, evaluando genes como blaCTXM, blaTEM y blaSHV. La validación de esta técnica se realizó mediante secuenciación de Sanger, demostrando la amplificación exitosa de los genes analizados en muestras aleatorias.
URI: https://bibliotecautpl.utpl.edu.ec/cgi-bin/abnetclwo?ACC=DOSEARCH&xsqf99=139816.TITN.
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