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Title: Aplicación de métodos cromatográficos y bioautográficos para la determinación de actividad antibacteriana e identificación de la fracción activa frente a Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis, de un extracto de actinobacteria marina “Streptomyces sp. MJG-05
Authors: Orellana Córdova, Michelle Stefania
metadata.dc.contributor.advisor: Cartuche Flores, Luis Emilio
Keywords: Staphylococcus aureus – Identificación
Cromatografía
Actinobacteria marina – Extracto
Bioquímico farmacéutico – Tesis y disertaciones académicas.
metadata.dc.date.available: 2016-09-12
Issue Date: 2016
Citation: Orellana Córdova, Michelle Stefania. (2016). Aplicación de métodos cromatográficos y bioautográficos para la determinación de actividad antibacteriana e identificación de la fracción activa frente a Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis, de un extracto de actinobacteria marina “Streptomyces sp. MJG-05. (Trabajo de Titulación de Bioquímico Farmacéutico). UTPL, Loja
Abstract: From Streptomyces's culture labeled as "MJG-05" and by means of the extraction with AcOEt and CH3(CO)CH3, 1,212g of crude extract was obtained. By means of chromatography in Sephadex LH-20 using CHCl3:MeOH (1:1) 31 fractions were obtained (F1-F31) which were gathered in 6 subfractions (F1-F6). The subfraction F2 was chosen (due to its high yield and its good biological activity) for a second fractionation using a mixture of Hex:CHCl3:MeOH (2:1:1), where 7 subfractions where finally obtained (F2f1 - F2f7) gathered by his chromatographic similarity. In the tests of biological activity, there was demonstrated that the Fraction F1, F2 and F2f2, they presented the highest antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis, with CMI's values between 62,5 and 15,625 µg/ml. By means of Bioautography agar overlay with Staphylococcus aureus as the reference bacterium, there were detected 5 spots differentiated by his respective factors of delay, the same ones who presented zones of inhibition of the bacterial growth, revealed as absence of color due to the no reduction of the tetrazolio salt.
Description: Del cultivo de Streptomyces “MJG-05” y mediante la extracción de los compuestos con AcOEt y CH3(CO)CH3, se obtuvo finalmente 1,212g de extracto crudo. Mediante cromatografía en Sephadex® LH-20 empleando CHCl3:MeOH (1:1) se obtuvieron 31 fracciones (F1-F31) que se reunieron en 6 subfracciones (F1-F6); escogiéndose la subfracción F2 (debido a su peso y su alta actividad biológica) para un segundo fraccionamiento empleando una mezcla de Hex:CHCl3:MeOH (2:1:1), obteniéndose finalmente 7 subfracciones (F2f1- F2f7) reunidas por su similitud cromatográfica. En las pruebas de actividad biológica, se demostró que la Fracción F1 y F2 y, del segundo fraccionamiento F2f2, presentaron la actividad antibacteriana más alta frente a Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis, con valores de CMI entre 62,5 y 15,625 µg/ml. A través de la técnica de Bioautografía sobre la cepa de Staphylococcus aureus se detectaron 5 manchas diferenciadas por sus respectivos factores de retardo, las mismas que presentaron zonas de inhibición del crecimiento bacteriano, revelado como ausencia de color por la no reducción de la sal de tetrazolio.
metadata.dc.identifier.other: 1181929
URI: http://dspace.utpl.edu.ec/handle/123456789/15606
metadata.dc.language: spa
metadata.dc.type: bachelorThesis
Appears in Collections:Bioquímico Farmacéutico

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